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沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用

2011-08-16分类号:TS207.4;R155

【作者】李小玲  刘斌  但现龙  王大鹏  周敏  史贤明  
【部门】上海交通大学农业与生物学院/中美食品安全联合研究中心/陆伯勋食品安全研究中心  
【摘要】【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。【结果】试剂盒对147株沙门氏菌和28株非沙门氏菌的检测结果显示,所有沙门氏菌均能扩增出362 bp的目标条带,非沙门氏菌仅扩增出520 bp的内标条带。试剂盒检测沙门氏菌基因组DNA的检测限为8.0 fg/PCR,检测染菌量为4—5 CFU/10 mL的牛奶样品,增菌8—10 h即得到阳性结果。反复冻融60次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果...
【关键词】沙门氏菌  聚合酶链式反应(PCR)  扩增内标  检测试剂盒
【基金】国家自然基金项目(31000779,30972485,U1031003); 国家“十一五”科技支撑计划项目(2009BADB9B01); 上海市科委化学试剂专项(10142201300)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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