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应用改良的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿完全抗原及鉴定

2011-11-15分类号:S948

【作者】陈力  胡鲲  姜有声  黄宣运  安健  杨先乐  
【部门】上海海洋大学国家水生动物病原库  中国水产科学研究院东海水产研究所  连云港市海洋与水产科学研究所  
【摘要】为完善无色孔雀石绿的免疫检测方法,通过改良的碳二亚胺法,改造无色孔雀石绿结构类似物副品红半抗原。经过紫外分光法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、质谱法鉴定,偶联反应成功,且偶联比最高达37∶1。以副品红—牛血清白蛋白偶联物为完全抗原免疫Balb/c小鼠,产生针对无色孔雀石绿的多克隆抗体,效价可达6.25×105;取抗体与无色孔雀石绿进行竞争抑制测定,IC50可以达到11.8 mg/L。该抗体与孔雀石绿及副品红存在交叉反应,交叉反应率均为100%。
【关键词】无色孔雀石绿  副品红  碳二亚胺法  偶联  鉴定  多克隆抗体
【基金】现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-49-17); 公益性行业(农业)科研专项经费(nyhyzx07-042;200803013)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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