黏质沙雷氏菌诱导的黄喉拟水龟SMART cDNA文库构建及相关基因的鉴定
2011-02-15分类号:S947
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】以致病黏质沙雷氏菌人工感染的黄喉拟水龟肝组织为材料,应用SMART(switching mechanism at 5’end of RNA transcript)技术,构建了黄喉拟水龟的全长cDNA文库。首先用SMARTTM PCR cDNA systhesis kit合成全长的双链cDNA,通过琼脂糖凝胶分级分离技术切除小片段的cDNA,将大于500 bp的cDNA连接到pGEM-T载体中,电转化到J M109感受态细胞。在构建好的文库中,经测定,文库约含有1.8×105个重组子,重组效率达90%,插入片段多在0.5~3.0 kb之间。对库中长度约为1 000 bp的80个基因进行了测序,结...
【关键词】黄喉拟水龟 黏质沙雷氏菌 SMART全长cDNA文库 基因鉴定
【基金】国家重点基础研究发展计划项目(2004CB117401); 广东省科技兴渔项目(B200701A06)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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