对虾WSSV病毒VP281基因的siRNA筛选研究
2011-10-28分类号：S945.46
【部门】广西水产研究所遗传育种与健康养殖重点实验室 广西兽医研究所
【摘要】构建一个对虾WSSV VP281基因的siRNA筛选体系,获取有效siRNA,为进一步开展siRNA抗WSSV研究建立基础。根据已报道的VP281基因编码序列,设计并合成一对引物,扩增出带双酶切位点的VP281。对VP281和质粒pEGFP-C1分别酶切后进行连接,获取表达载体pEGFP-VP281。利用专业软件设计3对靶向VP281的siRNA(VP281-siRNA1﹑VP281-siRNA2﹑VP281-siRNA3),并合成siRNA,将3种siRNA分别与pEGFP-VP281共转染PK细胞。采用Western blot方法检测GFP-VP281融合蛋白的表达,半定量RT-PCR方法...
【关键词】对虾 WSSV VP281 RNA干扰
【基金】广西科学研究与技术开发项目(桂科基0731035); 广西科学基金项目(桂科青0832069); 国家科技支撑计划项目(2007BAD29B01-6,2008BADB9B03)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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