血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用
2011-05-15分类号：S945
【部门】浙江省海洋水产研究所浙江海洋学院海洋与渔业研究所 浙江省海水增养殖重点实验室
【摘要】用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,经常规融合、间接ELISA方法筛选,将所得阳性克隆再经3次亚克隆后,共获得3株针对血卵涡鞭虫的单克隆抗体(2B2、3G4、4G7),单克隆抗体亚类鉴定表明,三者为IgG类抗体。用筛选的杂交瘤细胞株制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为5.12×10-4和8.00×10-4。进一步利用单克隆抗体建立间接荧光抗体方法对单抗特异性进行鉴定,阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血淋巴则未被染色。用单克隆抗体和多克隆兔抗血清以羊抗鼠HRP-IgG为酶标抗体,建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法,该方法对血卵涡鞭虫阳性标本检测符合率为100%。...
【关键词】三疣梭子蟹 血卵涡鞭虫 单克隆抗体 间接荧光抗体法 双抗体夹心ELISA法
【基金】浙江省自然科学基金项目(Y3080181,Y3080317,Y3090402); 2009浙江省大学生科技创新项目(新苗孵化项目); 2010浙江省大学生科技创新项目(2010R411037); 浙江省科技厅项目(2009C32062,2010F20006)
【所属期刊栏目】水产学报
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