三疣梭子蟹LGBP基因的重组表达及微生物结合实验
2011-03-15分类号：S917.4
【部门】宁波大学生命科学与生物工程学院教育部应用海洋生物重点实验室
【摘要】将扩增得到的三疣梭子蟹LGBP基因开放阅读框与表达载体pET-22b(+)连接,转化E.coil BL21(DE3)plysE后IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,发现诱导组比空载体和未诱导组多出一条分子量约为41 ku的表达产物,与预测的重组蛋白分子量大小基本一致。重组质粒在不同IPTG浓度和不同温度条件下诱导表达产物的SDS-PAGE分析结果显示,低浓度0.4 mmol/L IPTG和30℃诱导能有效减少菌体蛋白的本底表达。用纯化的重组蛋白连续免疫小鼠,4周后得到抗血清,经Western-blotting检测,其具有很好的特异性。微生物结合实验表明,重组表达的pET-LGBP具有较强...
【关键词】三疣梭子蟹 脂多糖-β-1 3-葡聚糖结合蛋白 重组表达 抗血清
【基金】国家创新研究群体科学基金(IRT0734); 宁波市科技局基金(2008A610073,2008C11001)
【所属期刊栏目】水产学报
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