尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证
2011-01-15分类号:S917.4
【部门】中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室
【摘要】采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况。结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件。荧光显微镜下观察到50%~60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGF...
【关键词】尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) β-肌动蛋白 启动子 绿色荧光蛋白 转染
【基金】国家科技支撑计划专题(2006BAD01A1202); 2007年公益性行业(农业)科研专项(3-49); 现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-48); 国家重点基础研究发展计划973计划项目(2004CB117401)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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