鲢三、四核苷酸重复微卫星标记的筛选及其特征分析
2011-05-15分类号：S917.4
【部门】大连海洋大学生命科学与技术学院 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】通过磁珠富集法筛选鲢(Hypophthalmichtys molitrix)的三、四核苷酸重复微卫星分子标记。提取鲢血液大片段基因组DNA,用限制性内切酶Sau3AI进行酶切,蔗糖密度梯度离心收集400~900 bp长度的片段,构建鲢全基因组PCR文库,用生物素标记的微卫星探针(TGA)8、(CAG)8以及(AGAT)6进行筛选,磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段,获得含有微卫星的单链序列;将这些序列通过PCR扩增,连接pMD 18-T载体,转入感受态大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,获得微卫星文库;再用γ-32P标记的放射性同位素探针进行二次杂交筛选,获得1 758个阳性...
【关键词】鲢 微卫星 三核苷酸和四核苷酸重复序列
【基金】国家973重大基础研究发展计划(2004CB117405)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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