黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析
2011-01-15分类号:S917.4
【部门】上海海洋大学水产与生命学院 烟台市牟平区渔业技术服务中心
【摘要】应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝(Monopterus albus)IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子。经PCR扩增鉴定插入片段范围为200~2 000 bp。随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对。进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证。结果表明,所建文...
【关键词】黄鳝 性腺 抑制性差减杂交 差减cDNA文库
【基金】上海市重点学科建设项目(S30701)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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