东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的表达、纯化及抑菌活性分析
2011-08-01分类号：S917.4
【部门】东北林业大学野生动物资源学院/国家林业局野生动物保护学重点开放性实验室 黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心
【摘要】【目的】利用毕赤酵母菌真核表达系统重组表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST,分析评价dybowskin-1ST的抑菌活性。【方法】采用TRIzol法提取蛙皮总RNA,经RT-PCR扩增获得抗菌肽dybowskin-1ST基因,将目的基因克隆到毕赤酵母菌分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组质粒pPIC9K-1ST。经电转化将pPIC9K-1ST转入到毕赤酵母菌GS115中,获得高效表达dybowskin-1ST的重组菌株。以甲醇诱导重组菌株,上清液经SDS-PAGE检测表明有目的蛋白dybowskin-1ST分泌表达。目的蛋白经Ni-agarose色谱柱分离纯化后,对大肠埃希氏菌、...
【关键词】东北林蛙 抗菌肽 毕赤酵母 抑菌活性
【基金】国家自然科学基金项目(30870301); 黑龙江省自然科学基金重点项目(ZJN0604-02)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递
