刺参甘露糖结合凝集素的原核表达、纯化及生物活性分析
2011-08-15分类号：S917.4
【部门】大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室 大连海洋大学辽宁省海洋生物资源与生境修复重点实验室 大连医科大学生物化学教研室
【摘要】为进一步研究刺参甘露糖结合凝集素(AJ-MBL)的功能及提高刺参自身免疫力,对AJ-MBL基因的CDS区进行原核表达、纯化并初步鉴定其生物学活性。采用RT-PCR法扩增AJ-MBL基因编码区,经酶切鉴定、序列分析后,将其CDS区498 bp片段克隆至原核表达载体pET28a中,得到重组质粒pET-AJ-MBL。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并经IPTG诱导表达出分子量约17 ku的融合蛋白。该蛋白以包涵体形式存在,用Ni2+离子亲和柱纯化。结果显示,获得高表达量的重组纯化蛋白。纯化的17 ku AJ-MBL进行红细胞凝集试验检测其生物学活性。凝集试验结果显示,AJ-MBL凝集...
【关键词】刺参 甘露糖结合凝集素 原核表达 蛋白纯化 红细胞凝集试验
【基金】辽宁省教育厅团队项目(2008T021)
【所属期刊栏目】水产学报
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