猪传染性胃肠炎病毒S基因的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测
2011-10-25分类号：S858.28
【部门】河南农业大学牧医工程学院
【摘要】为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank收录的TGEV-Miller毒株的S基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因的部分保守片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,得到重组质粒作为荧光定量RT-PCR检测的标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR扩增,并制作标准曲线,建立TGEV的荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明:该方法检测灵敏度可达30拷贝/μL,与猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒和猪细小病毒不发生交叉反应,具有重复性好、特异...
【关键词】猪传染性胃肠炎病毒 S基因 实时荧光定量RT-PCR技术
【基金】国家自然科学基金项目(31101796); 教育部博士点新教师基金(20104105120005); 河南省教育厅自然科学基金项目(2010A230007)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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