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麻疯树(Jatropha curcas L.)种子总DNA提取方法的建立和优化

2011-04-28分类号:S794.9

【作者】李静  曾德贤  吴子欢  范林元  刘飞虎  
【部门】云南大学植物遗传改良与应用实验室  云南省林木种苗工作总站  
【摘要】用种子提取DNA可省却培育幼苗过程而加快实验进度,为此建立了麻疯树(Jatropha curcas L.)种子DNA提取方法。针对麻疯树种子富含蛋白质、多酚及多糖等次生物质的特点,基于CTAB法进行优化,在研磨种子时加入抗氧化剂PVP去除多酚,接着用核分离缓冲液去除多糖,再通过酚-氯仿-异戊醇(体积比=25∶24∶1)抽提去除蛋白质。所提取的麻疯树种子总DNA浓度和质量均较高,经琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增得到了非常清晰的DNA条带。
【关键词】麻疯树  种子DNA提取  改良CTAB法
【基金】
【所属期刊栏目】西南农业学报
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