标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库的构建与EST测序分析

2011-02-16分类号:S794.1

【作者】曾日中  段翠芳  聂智毅  代龙军  黎瑜  
【部门】中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室/省部共建国家重点实验室培育基地  
【摘要】【目的】构建橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库,降低胶乳中存在的高丰度表达基因的拷贝数,提高胶乳表达基因的分离鉴定和EST测序分析效率。【方法】以橡胶树无性系热研7-33-97的胶乳为材料,将胶乳全长cDNA与Gateway供体载体pDONR222重组,构建了橡胶树胶乳的非剪切型全长cDNA原始文库,经检测原始文库的滴度为6.0×106 cfu/mL,平均插入片段长度大于1.5 kb,重组率约为100%,全长cDNA比例约为76%;利用基因组DNA饱和杂交技术对胶乳原始cDNA文库进行均一化处理,构建橡胶树胶乳的均一化全长cDNA文库。【结果】胶乳均一化全长cDNA文库的总库容量(总CFU)为1...
【关键词】橡胶树  胶乳  均一化  全长cDNA文库
【基金】国家重点基础研究发展计划项目(2007CB116203); 国家自然科学基金(30860232); 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(XJSYWFZX2009-13)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递