台湾杉ISSR反应体系的建立及检测
2011-08-15分类号:S791.280.4
【部门】华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室 贵州雷公山国家级自然保护区管理局
【摘要】在保持1 UTaq酶和0.2 mmol/L dNTP两个条件不变的情况下,通过对模板DNA的浓度、引物浓度与Mg2+浓度的筛选,建立了台湾杉的优化ISSR反应体系,即在25μL的反应体系中,含有40 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.2 mmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、1.8 mmol/L Mg2+、2.5μL 10×buffer。扩增程序为:94℃,4 min;94℃,45 s,51~56℃,45 s,72℃,2 min,40个循环;72℃,7 min。利用这种优化的反应体系,筛选出了10条稳定性强、清晰度高并表现出一定多态性的ISSR引物,并进一步筛选出了这10条引物的最...
【关键词】台湾杉 ISSR PCR条件 反应体系 引物筛选
【基金】国家自然科学基金项目(30901130)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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