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百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定

2011-04-20分类号:S791.14

【作者】林二培  马海泉  樊民亮  骆文坚  黄华宏  童再康  
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  浙江省庆元县林业局  浙江省林业种苗管理总站  
【摘要】应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA,建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析。结果表明:在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好。随机挑取其中1对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性...
【关键词】林木育种学  SSR标记  反应体系  百山祖冷杉
【基金】浙江省重大科技专项重点项目(2006C12059-4); 浙江省重点农业科研项目(2006C22064)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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