百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定
2011-04-20分类号:S791.14
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地 浙江省庆元县林业局 浙江省林业种苗管理总站
【摘要】应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA,建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析。结果表明:在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好。随机挑取其中1对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性...
【关键词】林木育种学 SSR标记 反应体系 百山祖冷杉
【基金】浙江省重大科技专项重点项目(2006C12059-4); 浙江省重点农业科研项目(2006C22064)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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