【摘要】将来源于Escherichia coli DH5α的γ-谷氨酰转肽酶基因克隆到高表达质粒pET-32α中,并转化E·coli BL21,构建茶氨酸生物合成的基因工程菌。工程菌在温度为20℃,OD600nm为1.5,IPTG浓度为0.1mmol/L,培养基初始pH为7的条件下,诱导培养6h,γ-谷氨酰转肽酶的酶活力达(4.41±0.17)U/mL,大约是出发菌株E·coli DH5α的18.4倍。直接以工程菌为催化剂,在200mmol/L谷氨酰胺、1.5mol/L乙胺盐酸盐、pH10、20℃的条件下,反应6h,茶氨酸合成量达12.6mg/mL,L-谷氨酰胺转化率为41.05%。