隐性核不育芝麻AFLP反应体系的优化
2011-12-15分类号:S565.4
【部门】中国农业科学院油料作物研究所/农业部油料作物生物学重点开放实验室
【摘要】以芝麻细胞核雄性不育系95ms-5为材料,对AFLP反应体系中的酶切连接、预扩增和选择性扩增中的关键性因素进行了优化。结果表明,在模板DNA质量浓度为200ng/μL、37℃酶切连接6h的情况下,预扩增中最佳Mg2+浓度为1.0mmol/L,dNTP最佳浓度为0.3mmol/L,Taq酶量以0.5U为宜,预扩增引物终浓度为0.4mmol/L;选择性扩增中,预扩增产物稀释10倍后,以Mg2+0.8mmol/L、dNTP 0.2mmol/L、Taq酶1.0U、选扩引物0.6mmol/L为宜。
【关键词】油料作物 芝麻 AFLP 反应体系 优化
【基金】国家科技支撑计划项目(2009BADA8B04); 国家芝麻产业技术体系(CARS-15-1-03); 湖北省自然科学基金重点项目(2010-35); 中国农业科学院油料作物研究所所长基金项目(1610172011007)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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