芝麻高纯度线粒体DNA提取技术研究
2011-06-28分类号：S565.3
【部门】中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学重点开放实验室
【摘要】以2个芝麻品种黄化苗为试验材料,通过比较植物线粒体DNA(mtDNA)提取过程中的关键影响因素DNase处理时间,建立了一种经济、快速、高效的芝麻mtDNA提取方法。该方法分别通过匀浆化处理、2 400 g离心15min结合12 000 g离心12 min的差速离心方法分离获得粗制线粒体,再经过DNase酶切处理1.5 h去除基因组DNA的污染,然后经0.6 mol/L蔗糖衬垫离心获得纯的线粒体,通过SDS-蛋白酶K方法裂解线粒体获得芝麻mtDNA。经过核酸蛋白分析仪分析表明:本技术每1 g芝麻黄化苗能获得1μg以上mtDNA;通过1.0%琼脂糖凝胶电泳检测表明获得mtDNA完整,无明显降解;...
【关键词】芝麻 mtDNA 提取 DNase处理
【基金】国家自然科学基金项目(30871552); 芝麻现代农业产业技术体系建设专项(nycytx-20); 中国农业科学院油料作物研究所所长基金资助项目
【所属期刊栏目】华北农学报
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