圆锥小麦ramosa2的克隆及其重组蛋白的DNA结合特性分析
2011-02-08分类号：S512.1
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 陕西省农业分子生物学重点实验室
【摘要】【目的】从四倍体圆锥小麦中克隆ramosa2(TtRa2),分析其序列特征、组织表达特异性和体外活性,为阐明ramosa2与麦类作物穗形态建成关系奠定基础。【方法】利用半定量RT-PCR分析ramosa2在不同组织中的表达水平,将其重组到pET-21a-MBP载体并在T7 Express菌株中诱导表达。利用Amylose亲和层析柱纯化重组蛋白,通过凝胶阻滞试验对其DNA特异结合能力进行鉴定。【结果】TtRA2含有LOB和RA2结构域,属于Ⅰ类LBD蛋白家族成员。TtRa2在幼穗中高丰度表达,而在根、茎、叶、种子中未检测到表达。融合的TtRA2主要以可溶性形式存在,其表达量占总蛋白的68.6%。...
【关键词】圆锥小麦 ramosa2 原核表达 LOB结构域 凝胶迁移阻滞分析
【基金】国家转基因专项“高产转基因小麦新品种选育”(2008ZX08002-003); 中央高校基本科研业务费专项(QN2009070); 西北农林科技大学青年学术骨干支持计划项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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