单头赤眼蜂DNA提取方法比较及其PCR反应体系优化
2011-04-15分类号：S476.3
【部门】沈阳农业大学植物保护学院
【摘要】为了探明有效的基因组DNA提取方法和PCR反应体系,从而得到符合分子生物学实验要求的基因组DNA模板的数量和质量,以单头松毛虫赤眼蜂为材料,应用CTAB法、SDS法和Chelex法进行基因组DNA提取效果的比较,并将核酸助沉剂用于赤眼蜂DNA的提取中,然后将提取的基因组DNA采用L16(45)正交设计试验,对影响赤眼蜂基因组DNA PCR反应体系的5因素(Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、DNA模板、Taq聚合酶)4水平进行筛选。结果表明:CTAB法优于SDS法和Chelex法,且核酸助沉剂的加入明显增强了模板DNA提取效果。同时确立的ITS2的PCR优化反应体系为:总体积为25mL,M...
【关键词】赤眼蜂 DNA提取 核酸助沉剂 正交设计 PCR体系优化
【基金】国家自然科学基金项目(30871674,30971962); 国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD0806-01); 辽宁省高校重点实验室支持计划项目(2008S203); 辽宁省教育厅科研项目(L2010488); 沈阳农业大学教师科研基金项目(20091012)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
文献传递
