真鲷虹彩病毒实时定量PCR检测方法的建立与应用
2011-04-15分类号：S943
【部门】山东出入境检验检疫局技术中心 深圳出入境检验检疫局水生动物疫病国家重点实验室
【摘要】以真鲷虹彩病毒(Red-sea breamiridovirus,RSIV)主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)的基因保守片段为靶序列,利用Pri mer Express3.0软件设计定量PCR引物,建立了RSIV的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法。将RSIV MCP基因连接pMD18-T载体,构建重组质粒,经过梯度稀释后作为标准品,根据标准品拷贝数(X)与Ct值的关系绘制了标准曲线,为Ct=-3.1841gX+40.270,相关系数R2=0.9969。熔解曲线分析表明,定量PCR产物的Tm值为82.5℃。该方法的检测限为2.20×102拷贝/反应,对流行...
【关键词】真鲷虹彩病毒 实时定量PCR 衣壳蛋白基因 SYBR GreenⅠ
【基金】国家质量监督检验检疫总局科研项目(2007IK267); 质检总局公益性项目(10-71)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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