鲤春病毒血症病毒基质蛋白基因的原核表达及多克隆抗体的制备
2011-11-18分类号：S941
【部门】福建师范大学生命科学学院 福建省农业科学院生物技术研究所 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
【摘要】根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)基因组序列(GenBank:NC_002803),人工合成M基因开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化工程菌株BL21(DE3),在0.1 mmol.L-1 IPTG、37℃下诱导5 h,获得高效表达的M蛋白,但其主要以包涵体的形式存在,经超声破碎、包涵体纯化后,再经Ni亲和层析柱纯化,获得高纯度的M蛋白.以纯化的M蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备了M蛋白的多克隆抗血清.ELISA检测显示抗血清的效价达1∶128000;western blot分析显示抗血清能够识别SVCV的M蛋白,表明其具有较好的灵敏性和特异性.
【关键词】鲤春病毒血症病毒 基质蛋白基因 原核表达 多克隆抗体
【基金】福建省自然科学基金项目(2009J01090); 福建省青年人才项目(2008F3018); 福建省公益类科研院所专项(2009R10035-6); 质检总局科研项目(2007IK022)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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