中华绒螯蟹和罗氏沼虾cyclin B蛋白的原核表达、抗体制备及其鉴定
2011-07-15分类号：S917.4
【部门】上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室 上海高校水产养殖学E-研究院
【摘要】从中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵巢cDNA中克隆了cyclin B基因的开放阅读框,分别连接到pGEX-2T和pET-32a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白GST-EsCB和Trx-MrCB。通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组蛋白的最佳表达条件分别为:0.1 mmol/L IPTG、37℃、4 h和0.1 mmol/L IPTG、30℃、6 h。重组蛋白主要以包涵体形式存在。亲和层析纯化重组蛋白,作为抗原免疫家兔,制备GST-EsCB和Trx-MrCB多克...
【关键词】中华绒螯蟹 罗氏沼虾 cyclinB多克隆抗体 原核表达 卵母细胞成熟
【基金】国家自然科学基金资助项目(30972242); 上海市科委重点科研项目(09391911100); 上海市教育委员会海洋生物学重点学科建设项目(J50701)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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