泥蚶金属硫蛋白的鉴定、原核重组表达及其组织细胞分布
2011-09-15分类号：S917.4
【部门】浙江大学动物科学学院 宁波大学生命科学与生物工程学院 浙江省水产技术推广总站
【摘要】采用RT-PCR方法扩增、克隆和鉴定了泥蚶(Tegillarca granosa)的金属硫蛋白(Metallothionein,MT)基因(TgMT)的开放阅读框(ORF)。基于金属硫蛋白氨基酸序列构建的系统进化树表明,泥蚶和魁蚶(Scapharca broughtonii)的亲缘关系最近。利用ORF序列,构建原核重组表达质粒。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序验证后转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导,表达重组蛋白,重组蛋白的分子量约为28.3 kD。可溶性分析表明重组蛋白主要以可溶性形式存在。用His-tag柱亲和纯化重组蛋白,并利用重组蛋白制备...
【关键词】泥蚶 金属硫蛋白 原核表达 组织细胞分布
【基金】浙江省自然科学基金项目(Y307606)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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