尼罗罗非鱼微阵列Fosmid基因组文库的构建及基因筛选
2011-01-15分类号：S917.4
【部门】西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室
【摘要】以pCC2FOS为载体构建尼罗罗非鱼Fosmid基因组文库,共挑选115 200个单菌落,保存在300块384孔样品板中,构建4 800个行池、7 200个列池、300个板池和25个超级池,形成微阵列,并对其进行复制备份。该文库插入片段平均长度约为40 kb,覆盖约罗非鱼基因组的3倍。连续传代实验研究表明,文库具有良好的稳定性。由于构建超级池-板池-行、列池三级池系统形成的微阵列,有助于快速、准确、有效地筛选目的基因,仅需77个PCR反应(超级池25+板池12+行池16+列池24)就能筛选到含有目的基因的一个单克隆,解决了普遍存在的文库筛选难题。通过文库尝试筛选18个与性别分化和生长相关基因,...
【关键词】尼罗罗非鱼 基因组文库 微阵列 基因筛选
【基金】农业部“九四八”项目(2010-Z56); 国家“八六三”高科技研究发展计划(2007AA10Z165); 国家自然科学基金委员会与香港研究资助局联合科研基金(30831160508); 国家自然科学基金(3087195,30770272,31030063); 教育部博士点基金项目(20090182110008); 重庆市科委攻关项目(CSTC,2008AC1016); 重庆市自然科学基金项目(CSTC,2008BB1006)
【所属期刊栏目】水产学报
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