脊尾白虾微卫星富集文库的构建与多态性标记的筛选
2011-12-15分类号:S917.4
【部门】中国海洋大学水产学院 中国水产科学研究院黄海水产研究所
【摘要】采用人工合成的生物素标记(AG)15探针及磁珠富集法构建了脊尾白虾基因组微卫星富集文库。将脊尾白虾基因组DNA经HaeⅢ酶切后,收集400~1 200 bp片段,连接特定接头,与生物素标记(AG)15探针杂交并捕获含有微卫星的DNA片段,然后连接到pMD18-T载体中,构建脊尾白虾微卫星富集文库。随机挑取947个克隆,经菌落PCR检验,其中667个为阳性克隆。从阳性克隆中随机选取184个克隆进行测序,有150个克隆含有微卫星序列,共获得199个微卫星序列,其中完美型158个(79.4%),非完美型27个(13.6%),复合型14个(7.0%)。根据微卫星序列,设计了119对微卫星引物,64对扩...
【关键词】脊尾白虾 富集文库 微卫星标记 遗传多样性
【基金】国家自然科学基金项目(30871933,40806067); 科技部农业科技成果转化资金项目(2010GB23260589)
【所属期刊栏目】水产学报
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