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猪圆环病毒2型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立

2011-07-18分类号:S858.28

【作者】修金生  吴顺意  曾新斌  陈小权  
【部门】福建农林大学动物科学学院  福建省农业厅动物疫控中心  
【摘要】参考GenBank上的猪圆环病毒2型(PCV2)全基因序列,根据其开放阅读框ORF1保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法来检测PCV2.所建立的荧光定量PCR方法最低检测限为82.2拷贝.反应-1,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍.扩增产物的融解曲线只出现1个单特异峰,无引物二聚体,溶解温度为(85.98±0.13)℃,对猪圆环病毒1型(PCV1)、猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒无扩增,可重复性好,组内变异系数为0.29%-1.35%,组间变异系数为0.96%-2.42%,检测速度快,从样本处理到报告结果得出仅需3 h....
【关键词】猪圆环病毒2型  SYBR GreenⅠ  实时荧光定量PCR
【基金】福建省农业科学技术项目(2009-03)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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