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植酸酶鼠源多克隆抗血清的制备

2011-02-08分类号:S852.5

【作者】胡骁飞  魏凤仙  邢广旭  职爱民  柴书军  孙亚宁  王磊  邓瑞广  张改平  
【部门】农业部动物免疫学开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南省农业科学院  河南省农业科学院畜牧兽医研究所  
【摘要】【目的】制备灵敏性高、特异性强的植酸酶多克隆抗体。【方法】将初步纯化的麸皮植酸酶蛋白经凝胶电泳鉴定纯度后,按50μg蛋白/只.次免疫Balb/C小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后一次免疫60 d后,摘眼球取血,制备抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定敏感性和特异性。【结果】凝胶电泳的麸皮植酸酶只有一个条带;血清植酸酶抗体效价达1×104;半数抑制浓度达148.87 ng.mL-1。此抗血清对市售的普通微生物植酸酶、市售包被微生物植酸酶及浓缩的微生物植酸酶的半数抑制浓度分别达到165.59、163.80和166.51 ng.mL-1,交叉反应率分别为89.85%...
【关键词】植酸酶  Balb/C小鼠  ELISA  多克隆抗血清
【基金】“十一五”国家科技支撑计划重大项目(2006BAK02A21); 河南省农业科学院博士科研启动基金项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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