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猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

2011-02-28分类号:S828;S852.4

【作者】邬成业  史平玲  乔松林  王爱萍  郝慧芳  杜晓明  王林林  张改平  
【部门】河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室  郑州大学生物工程系  
【摘要】为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(Porcine Fc gamma receptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受...
【关键词】猪FcγRⅢ受体  γ链  共转染  Marc145细胞
【基金】国家自然科学基金项目(30730068)
【所属期刊栏目】华北农学报
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