藏猪兴奋性氨基酸转运载体EAAC1基因的克隆与原核表达
2011-11-15分类号：S828;Q78
【部门】中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室/湖南省畜禽健康养殖工程技术研究中心 中国科学院研究生院 长沙大学生物工程与环境科学系
【摘要】兴奋性氨基酸转运载体EAAC1是肠道内谷氨酸的主要载体。本研究根据人的基因编码区设计一对特异性引物,以藏猪空肠总RNA为模板,通过RT-PCR获得一长约1600 bp的cDNA片段,T/A克隆后测序,并进行序列分析;将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。测序结果显示,获得的cDNA全长为1575 bp,编码524个氨基酸;EAAC1分子量为57 kD,等电点为5.34,GenBank登录号为GQ375513;该蛋白质具有3个N-糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点和1个cAMP/cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点,...
【关键词】藏猪 兴奋性氨基酸转运载体 序列分析 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(编号:31110103909;30928018;30901040;31001016); 中国科学院知识创新工程重要方向项目(编号:KZCX2-EW-412)
【所属期刊栏目】农业现代化研究
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