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猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建

2011-10-28分类号:S828.2

【作者】王淑娟  陈红英  魏战勇  刘金朋  耿静微  崔保安  
【部门】河南农业大学牧医工程学院  
【摘要】采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2),RT-PCR产物进行T-A克隆并测序,获得了猪IL-2基因序列。将BamHⅠ酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamHⅠ酶切并去磷酸化的pSY538载体上,通过PCR、酶切和测序鉴定,筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2。NotⅠ酶切pSY538/pIL-2后,得到含有双启动子LP2和EP2的猪IL-2基因片段,将其亚克隆到含有LacZ基因的pSY681载体上,筛选正向插入的重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2。测序结果表明,克隆的豫南黑猪IL-2基因长482 bp,包含1个完整读码框(465 bp),...
【关键词】猪白细胞介素-2  克隆  重组禽痘病毒  载体  构建
【基金】国家“十一五”科技支撑计划专项(2006BAD06A08)
【所属期刊栏目】华北农学报
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