金色链霉菌接合转移体系的构建
2011-09-18分类号：Q784;Q93
【部门】福州大学生物科学与工程学院 上海医药工业研究院
【摘要】以金色链霉菌J13基因组DNA为模板,扩增金霉素C6甲基化酶基因ctcF上下游序列作为两端同源交换臂,在两臂之间添加抗性筛选标记neo基因,并在该基因上游加入组成型强启动子ermE*,以强化筛选标记.将该外源DNA序列插入到质粒pSET152,构建重组质粒pFD106.转化大肠杆菌ET12567后,经接合转移导入金色链霉菌J13中,MS平板上筛选阳性接合子.PCR检测表明,重组质粒已整合到染色体DNA上.
【关键词】金色链霉菌 去甲基金霉素 接合转移
【基金】国家自然科学基金资助项目(31070093/30801449); 福建省教育厅资助项目(2007F5070)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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