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牛Nramp1基因启动子的克隆及其活性分析

2011-03-01分类号:S823

【作者】王洪梅  张利博  侯明海  王长法  王玲玲  孙涛  何洪彬  仲跻峰  
【部门】山东省农业科学院奶牛研究中心  
【摘要】【目的】牛Nramp1基因是主要的抗病候选基因,但其转录调控的分子机制尚不清楚。本研究欲确定牛Nramp1基因的启动子区域,找到启动子核心序列和主要的调控区,探索Nramp1基因表达机制。【方法】采用基因克隆、DNA测序、半定量RT-PCR和荧光素酶报告基因系统等技术手段,构建牛Nramp1基因5′侧翼区长片段及固定3′端的不同节段的pEGFP-N1和/或pGL3重组质粒,分别转染293T和RAW264.7细胞,并进行脂多糖(LPS)诱导,对不同片段的启动子活性进行定性和定量测定。【结果】牛Nramp1基因5′侧翼区长片段具有较强的启动子活性,+58—-89区域具有基本的启动子功能,+58—-...
【关键词】牛Nramp1基因  启动子活性  调控区  LPS诱导
【基金】国家“863”计划项目(2006AA10Z1D9,2007AA10Z169); 山东省自然基金(ZR2010CM012); 公益性行业科技专项(nyhyzx07-036-09); 泰山学者海外特聘专家(何洪彬); 转基因专项(2009ZX08007-006B)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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