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毛竹大片段双元细菌人工染色体基因组文库的构建

2011-08-20分类号:S795.7

【作者】管雨  杨洋  张智俊  罗淑萍  汤定钦  
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  新疆农业大学农学院  
【摘要】从毛竹Phyllostachys pubescens幼嫩叶片中提取纯化得到高质量的基因组DNA,经限制性内切酶BamH I对它们进行梯度酶切,脉冲场电泳选择合适酶切DNA片段,与脱磷酸化处理过的质粒载体pCLD04541按质量比3∶1相互连接,转化大肠杆菌Escherichia coli DH10B感受态细胞进行蓝白斑筛选,挑取白色克隆,获得重组率较高的阳性克隆,构建了含有104个克隆的双元细菌人工染色体(BIBAC)基因组文库,并通过脉冲场电泳检测分析后确定,所构建的毛竹BIBAC文库平均插入片段为105 kb,约覆盖5倍毛竹基因组。该文库的构建为毛竹基因组研究做好了前期的基础工作。
【关键词】分子生物学  毛竹  双元细菌人工染色体  基因组文库
【基金】浙江省自然科学基金资助项目(Y307469); 浙江省现代森林培育技术重点实验室开放基金资助项目(200605)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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