红楠ISSR-PCR反应体系的建立和优化
2011-04-15分类号：S792
【部门】中国林业科学研究院亚热带林业研究所 国家林业局泡桐研究开发中心
【摘要】为建立稳定的红楠ISSR-PCR最佳反应体系,在探索红楠基因组DNA提取的基础上,利用单因子试验和正交试验设计对反应体系进行优化。首先采用单因子试验对Mg2+、引物、模板DNA、dNTPs的不同浓度水平进行优化,找出ISSR-PCR反应各因素的最佳浓度;同时为进一步增加结果的可靠性,采用正交试验设计方法[L9(34)]对Mg2+、引物、模板DNA、dNTPs 4个因素3个浓度水平进行优化和筛选。综合两种试验方法结果,最终获得了红楠ISSR-PCR最佳反应体系:反应体系为20μL,Taq酶0.05 U.μL-1,Mg2+2.0 mmol·L-1,模板DNA 1 ng·L-1,dNTPs 0.3 ...
【关键词】红楠 ISSR-PCR反应体系 单因子试验 正交设计
【基金】中国林业科学研究院所基金“亚热带珍贵阔叶用材树种收集;评价;选育技术研究”(RISF6808); 浙江省科技计划面上项目“樟楠类优质用材树种优良品种选育;无性繁殖技术研究”(2009C32068)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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