标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

亮叶蜡梅ISSR反应体系的建立与优化

2011-04-15分类号:S685.99

【作者】周明芹  阮锐  陈龙清  
【部门】长江大学园艺园林学院  华中农业大学园艺林学学院  
【摘要】为了建立和优化亮叶蜡梅(Chi monanthus nitens Oliv.)的ISSR反应体系,对模板DNA的浓度、引物浓度、Mg2+浓度等影响因子进行了筛选。结果表明:在25μL的反应体系中,含有40 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.2 mmol/L dNTP、0.3μmol/L引物、1.5 mmol/L Mg2+、2.5μL 10×buffer的扩增效果最好。利用该优化的反应体系,筛选出了12条稳定性强、清晰度高、多态性高的ISSR引物,并对筛选出的12条引物在不同退火温度(51~56℃)下的扩增效果进行了比较,从而确定了每个引物的最佳退火温度。
【关键词】亮叶蜡梅  PCR条件  ISSR反应体系
【基金】国家自然科学基金项目(30571310); 湖北省自然科学基金项目(2010CDB04404)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
文献传递