荷花SRAP-PCR反应体系的优化与确立
2011-11-30分类号：S682.32
【部门】南京农业大学园艺学院 江苏省中国科学院植物研究所
【摘要】以荷花(Nelumbo nucifera Gaertn)品种‘新红’叶片为材料,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物和模板DNA用量5因素进行了优化,并确立了适用于荷花SRAP-PCR的最佳反应体系。结果表明:荷花的SRAP-PCR最佳反应体系为:反应总体积10μL,包含2.0 mmol.L-1 Mg2+、300μmol.L-1 dNTPs、0.5 UTaqDNA聚合酶、4μmol.L-1上下游引物、50 ng DNA及10×PCR Buffer。各因素水平变化对反应体系影响由大到小依次为:TaqDNA聚合酶、Mg2+、引...
【关键词】荷花 SRAP-PCR 正交试验设计 反应体系优化
【基金】国家公益性行业(农业)科研专项(200903020)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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