百合鳞片DNA提取及RGA-PCR体系的优化
2011-02-28分类号:S682.29
【部门】云南省农业科学院花卉研究所农业部花卉质检中心
【摘要】以百合鳞片为材料,采用改良的CTAB法获得了高质量的基因组DNA。通过影响PCR反应各因子的优化,建立了适合百合的RGA-PCR反应体系:25μl体系中含30 ng模板DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L dNTPs、0.6μmol/L引物及1.5 UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,44℃退火1 min,72℃延伸2 min,40个循环;最后72℃延伸7 min。利用该体系对35个百合品种进行RGA-PCR,表明该反应体系具有较好的稳定性和可靠性。
【关键词】百合 DNA提取 RGA-PCR
【基金】云南省自然科学基金资助项目(2007C121M); 国家科技支撑计划项目(2007BAD45B01;2007BAD45B04)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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