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一种适合扩增枣基因片段侧翼序列的SON-PCR技术

2011-02-16分类号:S665.1

【作者】谢南南  乔勇  赵锦  刘孟军  
【部门】河北农业大学生命科学学院  河北农业大学中国枣研究中心  
【摘要】【目的】建立一种适合枣相关基因侧翼序列延伸的SON-PCR技术。【方法】在原有SON-PCR基础上进行改进,将原有SON-PCR第2轮两段式反应改进为两步式,即第2轮首先加入单引物进行单侧嵌套引物引发5′端进行选择扩增,然后以第1步产物为模板,以少量的第1轮引物和第2轮引物进行特异性扩增,使特异性和效率进一步加强;将原来第2轮扩增模板浓度调整至10 ng·μL-1左右,以适合枣相关基因侧翼序列扩增。【结果】利用该体系对‘骏枣’1条626 bp的片段进行了侧翼序列扩增,获得了1条934 bp的编码富含亮氨酸重复序列的相关片段;同时以其它2条枣基因片段为起始序列进行了侧翼序列扩增,进一步验证了此技...
【关键词】枣  相关基因  SON-PCR  侧翼序列
【基金】河北自然科学基金项目(C2009000534;08D020); 河北省杰出青年基金项目(C2010000679); 国家科技支撑计划项目(2008BAD92B03;2007BAD36B07;2006BAD18B02)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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