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用正交设计法优化辣椒ISSR-PCR反应体系

2011-06-28分类号:S641.3

【作者】张卿哲  孟金贵  张应华  杨正安  许彬  
【部门】云南农业大学园林园艺学院  
【摘要】采用正交设计L16(45)对辣椒ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度)在4水平上进行优化试验。结果表明,最佳反应体系为:在25μl总反应体系中,含1×PCR缓冲液、2.0 mmol Mg2+、1.5 unitTaqDNA聚合酶、0.25 mmoldNTP、0.48μmol引物、120 ng模扳DNA。扩增程序为:95℃预变性5 min;94℃变性45 s,51℃退火1 min,72℃延伸2min,进行38个循环;最后72℃延伸10 min。新优化的辣椒ISSR-PCR反应体系和程序有很好的重复性和稳定性。此研究为今后利用ISSR技术对辣椒进行...
【关键词】辣椒  ISSR  反应体系  正交设计  优化
【基金】云南省自然科学基金(2008CD136)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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