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影响农杆菌介导朝仓花椒遗传转化因素研究

2011-11-15分类号:S573.9

【作者】曾晓芳  赵德刚  
【部门】贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室  贵州大学教育部绿色农药与农业生物工程重点实验室  贵州大学生命科学学院  
【摘要】为建立农杆菌介导的朝仓花椒遗传转化体系,以朝仓花椒叶柄及茎段为转化受体,研究了预培养时间、侵染菌液浓度、侵染时间、共培养时间等因素对转化效率的影响。获得转化体系如下:外植体预培养3d,在OD600为0.5~0.8菌液侵染10min,共培养3d,延迟7d筛选,以30和50mg/L卡那霉素(Kan)进行梯度筛选。结果表明:重悬液及共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS),可提高朝仓花椒Kan抗性愈伤率至24.6%;转化植株经GUS组织活性及PCR检测呈阳性,证实外源基因已导入朝仓花椒基因组中,利用本转化体系可为下一步将有重要经济价值外源基因导入花椒打下基础。
【关键词】朝仓花椒  农杆菌  遗传转化
【基金】国家转基因新品种培育重大专项(2008ZX08010-003)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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