小麦农杆菌转化体系的优化及HMW-GS 1Bx14基因转化
2011-12-15分类号:S512.1
【部门】西北农林科技大学生命科学学院/陕西省农业分子生物学重点实验室
【摘要】以小麦绵阳19和洛阳8716幼胚愈伤组织为材料,利用gus基因的瞬时表达,探讨了农杆菌菌株和侵染条件对转化效率的影响。结果发现,对于农杆菌菌株EHA105,小麦绵阳19和洛阳8716幼胚愈伤组织侵染的最佳条件均为OD6000.8,侵染30min。对于农杆菌菌株LBA4404,绵阳19和洛阳8716幼胚愈伤组织侵染的最佳条件分别为OD6001.0,侵染30min和OD6000.8,侵染60min。利用建立的农杆菌转化体系对小麦高分子量麦谷蛋白亚基1Bx14基因进行了转化,经潮霉素抗性筛选、PCR和PCR-Southern杂交检测,平均转化率为0.61%。
【关键词】小麦 农杆菌 转化 高分子量麦谷蛋白亚基
【基金】转基因专项重大课题子课题(2008ZX08002-004); 西北农林科技大学校长基金(A213021003)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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