斜纹夜蛾核型多角体病毒基因ⅡORF13的克隆、表达与启动子活性分析
2011-03-16分类号:S476.1
【部门】苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 中国农业科学院生物技术研究所
【摘要】【目的】研究新发现的斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ株基因ORF13的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV Ⅱ ORF13基因序列设计引物,经PCR扩增并克隆ORF13。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF13片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,起始密码子上游-84bp处发现杆状病毒晚期启动子基序ATAAG,没有发现明显的早期启动子基序。启动子活性分析和转录时相分析证实,ORF13是一个早期和晚期都表达的基因,在病毒感染2 h就开始转录,18 h达到最高峰,24 h以后转录水平有所下降,但基本维持恒定。pET-28a-O...
【关键词】斜纹夜蛾 核型多角体病毒 ORF13 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金(30770279); 苏州市科技支撑计划项目(SNG0924); 苏州大学“211”工程基金项目(XB114060)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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