琥珀酰辅酶A转移酶硝基化酪氨酸位点特异单克隆抗体的制备
2011-08-25分类号:R392.11
【部门】湖南农业大学生物科学技术学院
【摘要】线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测。应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Balb/c小鼠,分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了多株融合细胞。经对融合细胞多次筛选和检测,最终获得4株单克隆抗体,分别对应SCOT Tyr4和Tyr76硝基化后表位,其间接ELISA检测效价分别达到1∶128 000、1∶32 000、1∶512 000和1∶4 ...
【关键词】线粒体琥珀酰辅酶A转移酶 硝基化酪氨酸 单克隆抗体
【基金】湖南省研究生科研创新项目(CX2009B140)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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