冰岛硫化叶菌β-1;4-内切葡聚糖酶的同源表达、纯化与性质
2011-12-15分类号：Q814
【部门】华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室
【摘要】利用PCR技术从冰岛硫化叶菌(Sulfolobus islandicus)REY15A中分别扩增得到带有和不带有信号肽编码序列的β-1,4-内切葡聚糖酶基因(S.islandicus eng),将其克隆至硫化叶菌表达载体pZC2中,构建重组表达载体pZC2-eng-YS和pZC2-eng-WS,并转化至S.islandicus E233S(△pyrEF△lacS)。重组菌株经D-阿拉伯糖诱导后,细胞破碎上清经镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)柱纯化,得到重组蛋白。SDS-PAGE结果表明:不带有信号肽的葡聚糖酶(ENG-W)分子质量为41ku,带有信号肽的分子质量(ENG-SP)为43...
【关键词】冰岛硫化叶菌 β-1 4-内切葡聚糖酶 同源表达 硫化叶菌表达载体pZC2 重组蛋白
【基金】国家自然科学基金项目(31100096,31100050)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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