白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
2010-04-15分类号:S945.4
【部门】浙江大学动物科学学院 慈溪市水产技术推广中心
【摘要】根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因保守序列,利用Primer Explorerv 4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的LAMP检测方法与巢式PCR进行了比较分析。结果表明,LAMP最适反应在64℃恒温条件60min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果。LAMP方法的最低检出限为100拷贝/μL,灵敏度较巢式PCR高100倍,而且LAMP方法在1h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果。...
【关键词】对虾 白斑综合征病毒 环介导等温扩增 快速检测
【基金】浙江省科技计划项目(2005C33053); 宁波市农业科技攻关项目(2008C10041); 宁波市海洋与渔业专项资金项目(7-3)
【所属期刊栏目】水产学报
文献传递