三疣梭子蟹微卫星文库的构建及序列分析
2010-11-15分类号：S917.4
【部门】上海海洋大学大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室 上海海洋大学大洋生物资源开发与利用上海市高校重点实验室 上海海洋大学海洋科学学院
【摘要】采用磁珠富集法筛选三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的微卫星序列。经Sau3AI酶切后的200～1000bp DNA纯化片段,与两端已知序列的人工接头连接,用含有生物素标记的(CA)12和(GA)12探针杂交,根据磁珠的链酶亲和素与生物素特异结合的特性,捕获含微卫星序列的单链DNA,以此为模板用人工接头序列为引物进行PCR扩增,随后将获得的片段连接到PMD18-T载体上,转化至DH5α感受态细胞中,成功构建了微卫星富集文库。测序其中的60个阳性克隆,得到42条微卫星序列(基因登录号为:HQ283153-HQ283194),除探针使用的CA/GT、GA/CT重复外,还...
【关键词】三疣梭子蟹 磁珠富集法 筛选 微卫星 多态性
【基金】国家自然科学基金(30800840); 上海市科委青年科技启明星人才计划项目(09QA1402600)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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