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猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立

2010-01-08分类号:S858.28

【作者】鑫婷  侯绍华  贾红  郭晓宇  丁家波  李延鹏  丁敏  朱鸿飞  
【部门】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  中国兽医药品监察所  
【摘要】【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。
【关键词】猪繁殖与呼吸综合征病毒  RT-LAMP  检测
【基金】国家科技支撑项目(2006BAD06A04)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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