内蒙古羊源细粒棘球蚴Eg95基因原核表达及蛋白鉴定
2010-08-28分类号：S852.7
【部门】内蒙古大学生命科学学院 哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室 内蒙古呼和浩特市环境科学研究所
【摘要】在克隆内蒙古羊源细粒棘球蚴疫苗候选基因Eg95的基础上,构建原核表达载体pET-Eg95并转化E.coliBL21(DE3),优化表达体系,获得Eg95纯化蛋白。将Eg95基因从克隆质粒pMD19-T-Eg95亚克隆到原核表达载体pET44a(+)上,构建原核表达载体pET-Eg95,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达,优化表达条件。纯化的Eg95融合蛋白经SDS-PAGE和Western Blot鉴定其正确性和免疫学活性。原核表达载体pET-Eg95在大肠杆菌中高效表达,优化的原核表达条件为:当菌液OD600值为0.6时,加入终浓度为0.1mmol/L的IPTG,37℃,振荡培养5...
【关键词】细粒棘球蚴 Eg95 原核表达 蛋白纯化 生物活性
【基金】国家基础科学人才培养基金资助项目(J0730648); 内蒙古自治区高等学校科学研究项目((NJ03122)
【所属期刊栏目】华北农学报
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